میکروسکوپ فلورسانس توانایی ما برای تجسم و مطالعه نمونه های بیولوژیکی را متحول کرده است و به ما امکان می دهد در دنیای پیچیده سلول ها و مولکول ها جستجو کنیم.یکی از اجزای کلیدی میکروسکوپ فلورسانس منبع نوری است که برای تحریک مولکول های فلورسنت در نمونه استفاده می شود.در طول سال ها، منابع نوری مختلفی به کار گرفته شده اند که هر کدام ویژگی ها و مزایای منحصر به فردی دارند.
1. لامپ جیوه
لامپ جیوه فشار بالا، بین 50 تا 200 وات، با استفاده از شیشه کوارتز ساخته شده و کروی شکل است.داخل آن مقدار مشخصی جیوه وجود دارد.هنگامی که کار می کند، تخلیه ای بین دو الکترود رخ می دهد که باعث تبخیر جیوه می شود و فشار داخلی در کره به سرعت افزایش می یابد.این فرآیند معمولاً 5 تا 15 دقیقه طول می کشد.
انتشار لامپ جیوه پرفشار ناشی از متلاشی شدن و کاهش مولکول های جیوه در حین تخلیه الکترود است که منجر به انتشار فوتون های نور می شود.
این نور ماوراء بنفش و آبی-بنفش قوی ساطع می کند و آن را برای تحریک مواد فلورسنت مختلف مناسب می کند، به همین دلیل است که به طور گسترده در میکروسکوپ فلورسانس استفاده می شود.
2. لامپ زنون
یکی دیگر از منابع نور سفید رایج در میکروسکوپ فلورسانس، لامپ زنون است.لامپ های زنون مانند لامپ های جیوه ای طیف وسیعی از طول موج ها را از ماوراء بنفش تا مادون قرمز نزدیک ارائه می دهند.با این حال، آنها در طیف تحریک خود متفاوت هستند.
لامپ‌های جیوه انتشار خود را در مناطق نزدیک به فرابنفش، آبی و سبز متمرکز می‌کنند که تولید سیگنال‌های فلورسنت روشن را تضمین می‌کند اما با نور سمیت قوی همراه است.در نتیجه، لامپ‌های HBO معمولاً برای نمونه‌های ثابت یا تصویربرداری فلورسانس ضعیف رزرو می‌شوند.در مقابل، منابع لامپ زنون دارای مشخصات تحریک نرم تری هستند که امکان مقایسه شدت در طول موج های مختلف را فراهم می کند.این ویژگی برای کاربردهایی مانند اندازه گیری غلظت یون کلسیم سودمند است.لامپ های زنون همچنین تحریک قوی در محدوده مادون قرمز نزدیک، به ویژه در حدود 800-1000 نانومتر نشان می دهند.
لامپ های XBO دارای مزایای زیر نسبت به لامپ های HBO هستند:
① شدت طیفی یکنواخت تر
② شدت طیفی قوی تر در مناطق مادون قرمز و مادون قرمز میانی
③ انرژی خروجی بیشتر، رسیدن به دیافراگم هدف را آسان تر می کند.
3. ال ای دی
در سال‌های اخیر، یک رقیب جدید در حوزه منابع نور میکروسکوپ فلورسانس ظهور کرده است: LED.LED ها مزایای روشن و خاموش شدن سریع در میلی ثانیه، کاهش زمان قرار گرفتن در معرض نمونه و افزایش طول عمر نمونه های ظریف را ارائه می دهند.علاوه بر این، نور LED پوسیدگی سریع و دقیقی را نشان می‌دهد و به طور قابل‌توجهی سمیت نوری را در طول آزمایش‌های طولانی مدت سلول‌های زنده کاهش می‌دهد.
در مقایسه با منابع نور سفید، LED ها معمولاً در یک طیف تحریک باریکتر ساطع می کنند.با این حال، باندهای LED متعددی در دسترس هستند که امکان کاربردهای فلورسانس چند رنگی همه کاره را فراهم می‌کنند، و LEDها را به انتخابی روزافزون در تنظیمات میکروسکوپ فلورسانس مدرن تبدیل می‌کنند.
4. منبع نور لیزر
منابع نور لیزر به شدت تک رنگ و جهت دار هستند، که آنها را برای میکروسکوپ با وضوح بالا، از جمله تکنیک های با وضوح فوق العاده مانند STED (تخلیه انتشار تحریک شده) و PALM (میکروسکوپ محلی سازی فعال شده عکس) ایده آل می کند.نور لیزر معمولاً برای مطابقت با طول موج تحریک خاص مورد نیاز برای فلوروفور هدف انتخاب می‌شود و انتخاب‌پذیری و دقت بالایی را در تحریک فلورسانس ارائه می‌کند.
انتخاب منبع نور میکروسکوپ فلورسانس به نیازهای آزمایشی خاص و ویژگی های نمونه بستگی دارد.لطفا در صورت نیاز به کمک با ما تماس بگیرید
زمان ارسال: سپتامبر 13-2023